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260916 보호되어 있는 글 입니다. 2026. 9. 21.
2026.9.15 존대 세척트랜스 버퍼 2L주사기 까기한식연 세럼 1세트 라벨링 2026. 9. 16.
gel 만들기~sample Loading 2024. 7. 10.
3. 단백질 정량 준비물: 3DW, Protein assay, BSA, 정량용 판(?), 티슈 * Sample 및 BSA 3시간 해동 후 진행 1. 새 Conical tube에 라벨링  2. protein assay % 맞게 3dw와 섞기 * 25% protein assay(P.A) = 75% 3DW+25%PAex) 5ml 25% PA = 3.75ml 3DW+1.25ml PA* 만들고 시약 바로 정리*PA: 4 ℃ 냉장고 우측에 위치  A: stadard / 25% PA + BSA  = 200㎕ *stadard: 200㎕ -n㎕ / n=0, 2, 4, 6, 8 (n만큼 BSA 채우기)B: 25% PA + Sample = 202㎕  3. 1 well당 200㎕ 25% PA 넣기 4. Standard n수만큼 빼서 휴지에 제.. 2024. 6. 3.
4. SDS-PAGE용 로딩 sample 만들기 준비물: 근육샘플, 3DW, LSB(4X), β-ME, 1.5-e-tube, 아이스박스  *ICE에서 Sample 2시간동안 해동 후 진행 1. 엑셀을 이용하여 필요한 LSB양을 계산한다.  2. 'Dry block heater' 전원 켜기(온도 올라가는데 시간 걸림)  2. 1.5-e-tube에 4X LBS, 샘플 수만큼 라벨링하기   3.1.5-e-tube에 4X LBS와 β-ME 섞기(* 사용설명의 용량 잘 확인하기, 우리가 쓰는 모델의 경우 / 4X LBS: β-ME=9:1)ex. 200μL = 4X LBS 180μL + β-ME 20μL   4. 3DW → LSB(4X Sample buffer) → mix→ 샘플(섞이게 넣기) →  mix → ice 5. heater에 넣기 전에 다시 한 번  .. 2024. 6. 3.
2. Homogenization 준비물: RIFA buffer, 쓰레기통, 1000㎕ 피펫, 팁, 원심분리기?, 아이스박스, 스터... 균일화용 튜브  1. -80도 냉동실에서 적출한 근육 샘플을 얼음 통(?)에 담아둔다.  2. homogenizer용 튜브를 샘플 수에 맞게 준비하고 라벨링한다.(이 때, 1.5-e-tube도 샘플수에 맞게 준비하고 라벨링)  3. 종이컵 사이에 튜브를 끼우고 'TARE' 버튼을 누른 후 샘플을 옮겨 담는다. 4. 샘플 무게를 측정 후 샘플 무게에 맞게 RIFA buffer를 넣는다* buffer volume = sample 무게 x 10* Rat의 경우 근육 크기가 커 powder 작업 후(0.05g 정도 사용) 균질화 과정이 진행되어 14배 정도 사용* mice는 근육 크기가 작아 바로 샘플을 사용.. 2024. 5. 20.
Sampling sampling 준비 1. body weight 측정 2. 마취 10초 (통 꽉 닫지 않기) 3. 30초 정도 이후 발 신경 눌러 마취 확인 4. 전체 에탄올 소독 5. 멸균 주사침으로 손목 고정 6. 가슴쪽 피부 절단> 근막 절단 7. 혈액 체취 용 주사기 확인 8. 심장 내 혈액 체취(혈액 나오는 부분 잘 인지하기) 9. 심장 적출 > PBS 용액에 넣기 > 50% formalin, 50% -80도 10. 간 적출을 위해 밑에 방향으로 절개 11. 양 쪽간 동일한 크기로 자르기(손상 주의) > PBS > 50% formalin, 50% -80도 12. 등쪽 REF 적출 > formalin 13. 부고환/ 난소 옆 EPI 적출 > 무게 측정 >-80도 14. 발목 피부 절개(한바퀴) 15. 허벅지 안쪽.. 2024. 5. 19.
sampling 준비 준비물: 수술도구, 에탄올, PBST(1X), 튜브 with Formalin(8~10ml), 냉동보관용 샘플 튜브, 주사기, 장갑, 액체질소, 스티로품 박스(40% ice), PBST 담을 작은 유리통 실험 준비시 일회용 장갑 필수 착용, 포르마린 사용 시 마스크 필수.  formalin 10도 냉장고에 위치. 직접 튜브에 담을면 됨.액체질소 치대에서 채움. 통 잘 챙겨갈 것아이스박스 출발 전에 40% 얼음 채워서 가기 > 포르말린 튜브 보관주사기: 혈액 채취용(마리수만큼)  formalin 고정: femur, tibia / SOL, EDL, TA(50%), Heart(50%), Liver(50%), REF, BAT(50%) -80°C: GAS, TA(50%), Heart(50%), Liver(50%),.. 2024. 5. 16.
저항성 운동이 OLETF 쥐 시상하부 Leptin receptor (Ob-R), GLUT2 mRNA 및 골격근 GLUT4 mRNA 발현에 미치는 영향 (*) 제 2형 당뇨 - 당뇨병의 90%를 차지하며, 인슐린 저항성 및 만성적 고혈당을 특징으로 하는 비만 관련 대사 질환 - 고혈당(chronic hyperglycemia) > 근육, 심장, 간, 뇌 등을 포함한 주요 기관의 생리적 기능저하 초래 > 다양한 합병증 발생 위험 증가시킴. > 엄격한 혈당관리 요구됨. (*) 시상하부(hypothalamus) (*: 선행연구) - 식욕 중추기관으로, 말초 에너지 상상성 유지를 위한 다양한 신호 통합, 전달 - 지방조직에서 분비된 렙틴, 혈관-뇌 장벽(Blood-Brain-Barrier, BBB) 통과하여 시상하부에 존재하는 수용체와 결합 > 체내 에너지 저장 상태에 관한 정보 제공 > 되먹임 기전(feedback mechanism)에 의해 에너지 섭취 및 체.. 2024. 4. 15.
노화 쥐 해마 CA1에서의 운동을 통한 BDNF 발현 유도 및 PI3KAKT에 의한 synaptic 단백질 발현 단백질 정량분석이라고만 나와있어서 처음에는 이해가 가지 않았으나, 단백질 분류 및 western blot 실행 두 가지를 합쳐놓은 것. 실험동물의 성별이 나와있지 않는데 이는 성별과 해마 사이에 영향이 없는 걸로 판단. * BDNF 1.신경성장인장의 일종으로,신경세포의 성장, 발달, 가소성, 생존 등에 중요한 역할 2. 특히 해마 영역에서 높은 수준으로 유도되며, 학습, 기억,및 인지 능력 등 해마 의존성 작업 수행 능력과 밀접한 관련이 있음. (해마에서의 신경 전달, 신경세포의 흥분성, 시냅스의 가소성 조절하는 주요 인자) * 단백질 합성과정 pro > post > mature 신경세포 mRNA = 핵심 DNA p-AKT (포스포 AKT. 인산화 반응 . 인산이 붙으면 활성화) 2024. 4. 15.
Exercis Training Attenuates Obesity-Induced Skeletal Muscle Remodeling and Mitochondria-Mediated Apoptosis in the Skelatal Muscle 운동 훈련은 골격근에서 비만 유발 골격근 리모델링 및 미토콘드리아 매개 세포 사멸을 약화시킨다. factor 하나로 결론짓는 것보다 상하위 요인도 추가로 조사하면 신뢰도를 높일 수 있음. 이 factor가 실질적인 영향을 미치는지에 대한 연구(확실한 물증 제공 필요)가 없다면 선행연구 제시 필요 횡단면적의 위치가 나와있지 않아서 결과에 대한 신뢰도가 떨어짐. +횡단면적을 보기에는 TYPE 2 섬유가 좋음. Apoptosis 세포자살, 세포자멸사 - 세포예정사의 일종으로 세포 형태와 내부의 생화학적 변화로 말미암아 세포가 죽는 것. - 갑작스럽게 세포가 피해를 입어 야기되는 세포사인 괴사(Necrosis)와 대조적으로 세포자살은 생물체에 해를 끼치지 않으며 생명주기에 유익 - 활성화 메커니즘은 내부 요인에.. 2024. 4. 15.
운동이 외상 후 스트레스 장애를 받고 태어난 새끼 쥐의 인지기능에 미치는 영향 운동과학, 2011 완전 생리학이라기보다 생리+심리 논문 문제점 1. PTSD 유발 쥐(임신쥐)들의 인지 검증이 되지 않아서 신뢰도가 떨어짐(사냥개가 PTSD를 유발했는지 알 수 없음.) 2. PTSD가 해마에 미친 영향에 대한 자료가 없다. 따라서 PTSD 유발 후 해마에 문제가 생겼는지 알 수 없다. + 보통 개들은 쥐를 장난감으로, 고양이는 사냥에 목적을 둠. 사냥개가 충분하 PTSD를 유발하였는지 알 수 없다. 3. 실험 표본의 수가 적어서 PTSD가 나타난지 확인하기 어렵다. 4. 짧은 운동기간으로 운동이 해마에 영향을 미쳤는지 확인하기 어렵다. 2024. 4. 15.