Sampling

sampling 준비

1. body weight 측정
2. 마취 10초 (통 꽉 닫지 않기)
3. 30초 정도 이후 발 신경 눌러 마취 확인
4. 전체 에탄올 소독
5. 멸균 주사침으로 손목 고정
6. 가슴쪽 피부 절단> 근막 절단
7. 혈액 체취 용 주사기 확인
8. 심장 내 혈액 체취(혈액 나오는 부분 잘 인지하기)
9. 심장 적출 > PBS 용액에 넣기 > 50% formalin, 50% -80도
10. 간 적출을 위해 밑에 방향으로 절개
11. 양 쪽간 동일한 크기로 자르기(손상 주의) > PBS > 50% formalin, 50% -80도
12. 등쪽 REF 적출 > formalin
13. 부고환/ 난소 옆 EPI 적출 > 무게 측정 >-80도
14. 발목 피부 절개(한바퀴)
15. 허벅지 안쪽으로 피부 절개
16. 핀셋(?)으로 잡고 피부 벗기기
17. TA와 EDL 사이 면도칼로 분리
18. 찝히는 도구로 ta 끝 잡고 자르기. 이후 들어올려 TA 분리, 옆에 백색 근육 EDL > 무게 측정 > (50% TA formalin), -80도
19. 뒤집어서 지방층 다 없앤 후
20. GAS 분리. 사이에 SOL 제거 > GAS 사이의 근육 제거 > 무게 측정 > GAS: -80도, SOL: formalin
* 좌우 2번 실행
21. (꼬리 기준) 한쪽 골반뼈 포함하는 하체 절반 뼈 자르기 > formalin
22. 은박지에 사체 올려두기
23. 실험 종료 후 사체 처리

* 한 마리당 최대 20분 안으로 샘플링 끝내기
* 조직 무게 잴 때 안에 통 옮기지 않고 조직만 옮겨서 무게 재기
* 문제 발생시 빠르게 이야기 하기
* 기록 작성 시 비교하며 문제가 있는지 확인하기
* formalin, -80도 보관인지 정확히 인지하기

<실험 도구 정리>
- 해부 끝난 직후 칼, 핀셋 등 바로 세척
- 세제를 이용해 구석구석 깨끗하세 씻고
- pure water로 한 번 더 씻고
- 티슈 위에 자연 건조 후 정리

24. blood 샘플링 할 때 실온에서 두고 4도 냉장고에서 보관(~1시간 이상) 후 혈청 분리되는 거 보이면
25. 원심 분리기 4도 3000RPM 15분 작동
* 밸런스 맞춰서 넣기. 짝수로 넣기
26. serum 튜브 만들기
27. 분리된 혈청만 100ul 피펫을 이용하여 분리하여 -80도 보관
* 피 안 섞이게 주의하기